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HaloTag® 载体是为在哺乳动物细胞中表达 C 端带有 HaloTag®标签的融合蛋白而设计的。 HaloTag® 融合蛋白表达后，可用于与 HaloTag® 荧光配基结合的蛋白的定位和转运的成像。此外，HaloTag® 融合蛋白可与其蛋白伴侣作为复合物被纯化或 Pull Down。我们提供两种 HaloTag® 融合载体作为您克隆试验的选择：• pHT Vector Series： 多克隆位点 (MCS) 质粒用于传统型的克隆。• pF Vector Series： Flexi® 载体克隆系统——一种蛋白编码序列的定向克隆方法。该方法建立在两种位点稀有的限制性酶 SgfI 和PmeI 的基础上，可以将蛋白编码区在不同的 Flexi® 载体之间转移，而不需要重新测序，该方法快速、有效、保真度高。注意： Flexi® 载体带有致死性 barnase 基因，可以减少载体构建过程中不带有插入片段的阴性克隆的产生。 barnase 基因可被插入的目的DNA 片段所替代。所购买的这一类载体在没有插入目的 DNA 片段的情况下，带有空载体的常用实验室大肠杆菌菌株不能生长.
询价核受体检测可以通过传统的方法即利用上游带有核受体反应 元件的最小启动子载体来完成。您也可以选择病毒元件像小鼠乳腺 肿瘤病毒长末段重复启动子来检测雄激素或糖皮质激素的响应( 如 pGL4.36)。很多情况下，利用这些方法进行的研究需要选择含有合 适的内源核受体的细胞系，就是说每一种核受体的研究可能需要选 择不同的细胞系。利用酵母双杂交原理的方法也适用于核受体的研 究。核受体配基结合域与 GAL4 DNA 结合域相融合，通过上游含有 GAL4 上游激活序列的重复片段的最小启动子的萤火虫萤光素酶载体 转染至细胞中。配基结合区域会与配基结合形成同源或异源的二聚体， 以及与激活因子或抑制因子相互作用。这种单杂交系统可帮助您在很多细胞系中研究您所感兴趣的核受体。
询价HaloTag® 载体是为在哺乳动物细胞中表达 C 端带有 HaloTag®标签的融合蛋白而设计的。 HaloTag® 融合蛋白表达后，可用于与 HaloTag® 荧光配基结合的蛋白的定位和转运的成像。此外，HaloTag® 融合蛋白可与其蛋白伴侣作为复合物被纯化或 Pull Down。我们提供两种 HaloTag® 融合载体作为您克隆试验的选择：• pHT Vector Series： 多克隆位点 (MCS) 质粒用于传统型的克隆。• pF Vector Series： Flexi® 载体克隆系统——一种蛋白编码序列的定向克隆方法。该方法建立在两种位点稀有的限制性酶 SgfI 和PmeI 的基础上，可以将蛋白编码区在不同的 Flexi® 载体之间转移，而不需要重新测序，该方法快速、有效、保真度高。注意： Flexi® 载体带有致死性 barnase 基因，可以减少载体构建过程中不带有插入片段的阴性克隆的产生。 barnase 基因可被插入的目的DNA 片段所替代。所购买的这一类载体在没有插入目的 DNA 片段的情况下，带有空载体的常用实验室大肠杆菌菌株不能生长.
询价CheckMate™/Flexi® Vector Mammalian Two-Hybrid System (CheckMate™/Flexi® 哺乳动物双杂交系统 ) 提供一种手段，可用于确定、印证和研究两种蛋白或结构域间可能的相互作用，也可用于构建稳定的细胞系进行基于细胞的检测。哺乳动物来源的目标蛋白，系统可在模仿细胞自然环境的情况下表达并进行翻译后修饰。在酵母双 杂交系统中，目标蛋白(" X ")与DNA结合结构域区融合，另一蛋白(" Y ") 与转录激活结构域融合。 该系统基于三种质粒共转染进入哺乳动物细胞，而且每种质粒皆有独一无二的特点。 pFN10A(ACT) Flexi® Vector (pFN10A(ACT) Flexi® 载体) 在克隆位点上游含有疱疹单病毒VP16 的转录激活结构域；pFN11A (BIND)Flexi® Vector (pFN11A(BIND)Flexi® 载体) 在克隆位点上游含有酵母GAL4DNA 结合结构域；pFN11A(BIND) Flexi® Vector (pFN11A(BIND)Flexi® 载体) 在 SV40启动子的调控下可表达海肾萤光素酶，进而可校准转染效率的不同。
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询价三种pBiT3.1 HiBiT Vectors 经过设计，可将11 个氨基酸的HiBiT 肽段标签与目的蛋白的氨基端或羧基端相连接。这些载体包含多克隆位点，可用于制备HiBiT 融合蛋白。pBiT3.1 Vectors 适用于稳定和瞬时的基因表达，并编码卡那霉素和新霉素抗性，分别适合细菌和哺乳动物细胞中的筛选。目的蛋白与HiBiT 标签之间的接头长度可以灵活选择，具体取决于所使用的限制性内切酶。 • pBiT3.1-N [CMV/HiBiT/Blast] Vector 将HiBiT 标签添加到目的基因的N 端。插入片段的3’端应含有终止密码子，以便终止翻译。 • pBiT3.1-C [CMV/HiBiT/Blast] Vector 将HiBiT 标签添加到目的基因的C 端。注意：插入片段不应当编码终止密码子，而目的基因应含有正确的翻译起始序列，包括N 端的ATG 密码子或Kozak 序列。 • pBiT3.1-secN [CMV/HiBiT/Blast] Vector 将HiBiT 标签添加到成熟的跨膜或分泌蛋白的N 端。 这种载体在HiBiT 标签的N 端编码IL-6分泌信号肽，可将带HiBiT 标签的蛋白直接运输至哺乳动物细胞的质膜，实现细胞表面表达或分泌。注：插入片段的3’端应含有终止密码子，以便终止翻译。 HiBiT 肽段标签，与Nano-Glo® HiBiT 检测系统结合使用，可对目的蛋白实现生物发光检测。这样无需使用抗体，即可利用生物发光法对蛋白进行定量。
询价Nanoluc® 萤光素酶蛋白具有蛋白分子小(16kDa) 和光信号强的特点，使其成为蛋白融合表达的理想伴侣。 Nanluc 融合表达的蛋白可以用于多种应用方向：蛋白稳定性的报告子，细胞成像生物发光 探针，作为蛋白相互作用或蛋白小分子相互作用研究中常用的生物发光能量共振转移技术的供体 (BRET)。 NanoLuc® 蛋白融合表达载体提供两种模式克隆载体，能够轻松 与目标蛋白进行 N 端或 C 端融合， 您可根据需要选择： • pNLF 载体系列：可与全长 Nluc 蛋白生成 N端或 C端融合蛋白，或者可通过传统的多克隆位点 (MCS) 克隆将分泌型 Nluc 蛋白与目标蛋白 N 端融合。 • pF 载体系列：能通过 Flexi® 载体克隆系统生成 Nluc 的 N- 或 C-端融合蛋白—一种定向克隆技术，基于两个稀有酶切位点的限制性内切酶 , SgfI 和 PmeI, 这种技术能够快速，高效，高保真性地在不同 Flexi® 载体间转移蛋白编码区，而无需重新测序。
询价Nanoluc® 萤光素酶蛋白具有蛋白分子小(16kDa) 和光信号强的特点，使其成为蛋白融合表达的理想伴侣。 Nanluc 融合表达的蛋白可以用于多种应用方向：蛋白稳定性的报告子，细胞成像生物发光 探针，作为蛋白相互作用或蛋白小分子相互作用研究中常用的生物发光能量共振转移技术的供体 (BRET)。 NanoLuc® 蛋白融合表达载体提供两种模式克隆载体，能够轻松 与目标蛋白进行 N 端或 C 端融合， 您可根据需要选择： • pNLF 载体系列：可与全长 Nluc 蛋白生成 N端或 C端融合蛋白，或者可通过传统的多克隆位点 (MCS) 克隆将分泌型 Nluc 蛋白与目标蛋白 N 端融合。 • pF 载体系列：能通过 Flexi® 载体克隆系统生成 Nluc 的 N- 或 C-端融合蛋白—一种定向克隆技术，基于两个稀有酶切位点的限制性内切酶 , SgfI 和 PmeI, 这种技术能够快速，高效，高保真性地在不同 Flexi® 载体间转移蛋白编码区，而无需重新测序。
询价这些载体用于在大肠杆菌和无细胞表达系统中通过T7 RNA聚合酶启动子进行HaloTag® 融合蛋白的诱导表达。表达水平高度依赖于蛋白质的特性，但是一般N- 末端HaloTag® 融合蛋白( 如pFN18A/ K，Cat.# G2751,G2681) 可以提高表达水平、增强复性，并提高所表达蛋白的溶解度。 有两种类型的HaloTag® 载体：应用传统克隆方法的多克隆位点(MCS) 载体和Flexi® 系统载体。Flexi® 载体系统是一种简单的蛋白编码序列的定向克隆方法。该方法建立在两种位点稀有的限制性酶Sgfl 和Pmel 基础上，可以将蛋白编码区在不同的Flexi® 载体之间转换，而不需要重新测序，该方法快速，有效，保真度高。只有两个N- 末端标记的载体或者从N- 末端到C- 末端的载体可以发生直接转化，多克隆位点载体和几个Flexi® 系统载体一个His6-HaloTag® 双重标签。这种双标签能够使用重复利用的镍树脂进行蛋白质纯化，保留了HaloTag® 共价标记属性。 HaloTag® Vectors for E. coli and Cell-FreeProtein Expression多克隆位点载体pH6HTN His6HaloTag® T7 Vector (Cat.#G7971) 用于大肠杆菌和T7无细胞表达系统中具有N- 末端His6-HaloTag® 双标签蛋白的表达。 pH6HTC His6HaloTag® T7 Vector (Cat.# G8031) 用于大肠杆菌和T7无细胞表达系统中具有C- 末端His6-HaloTag® 双标签蛋白的表达。
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