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这些载体用于在大肠杆菌和无细胞表达系统中通过T7 RNA聚合酶启动子进行HaloTag® 融合蛋白的诱导表达。表达水平高度依赖于蛋白质的特性，但是一般N- 末端HaloTag® 融合蛋白( 如pFN18A/ K，Cat.# G2751,G2681) 可以提高表达水平、增强复性，并提高所表达蛋白的溶解度。 有两种类型的HaloTag® 载体：应用传统克隆方法的多克隆位点(MCS) 载体和Flexi® 系统载体。Flexi® 载体系统是一种简单的蛋白编码序列的定向克隆方法。该方法建立在两种位点稀有的限制性酶Sgfl 和Pmel 基础上，可以将蛋白编码区在不同的Flexi® 载体之间转换，而不需要重新测序，该方法快速，有效，保真度高。只有两个N- 末端标记的载体或者从N- 末端到C- 末端的载体可以发生直接转化，多克隆位点载体和几个Flexi® 系统载体一个His6-HaloTag® 双重标签。这种双标签能够使用重复利用的镍树脂进行蛋白质纯化，保留了HaloTag® 共价标记属性。 HaloTag® Vectors for E. coli and Cell-FreeProtein Expression多克隆位点载体pH6HTN His6HaloTag® T7 Vector (Cat.#G7971) 用于大肠杆菌和T7无细胞表达系统中具有N- 末端His6-HaloTag® 双标签蛋白的表达。 pH6HTC His6HaloTag® T7 Vector (Cat.# G8031) 用于大肠杆菌和T7无细胞表达系统中具有C- 末端His6-HaloTag® 双标签蛋白的表达。
询价HaloTag® 载体是为在哺乳动物细胞中表达 C 端带有 HaloTag®标签的融合蛋白而设计的。 HaloTag® 融合蛋白表达后，可用于与 HaloTag® 荧光配基结合的蛋白的定位和转运的成像。此外，HaloTag® 融合蛋白可与其蛋白伴侣作为复合物被纯化或 Pull Down。我们提供两种 HaloTag® 融合载体作为您克隆试验的选择：• pHT Vector Series： 多克隆位点 (MCS) 质粒用于传统型的克隆。• pF Vector Series： Flexi® 载体克隆系统——一种蛋白编码序列的定向克隆方法。该方法建立在两种位点稀有的限制性酶 SgfI 和PmeI 的基础上，可以将蛋白编码区在不同的 Flexi® 载体之间转移，而不需要重新测序，该方法快速、有效、保真度高。注意： Flexi® 载体带有致死性 barnase 基因，可以减少载体构建过程中不带有插入片段的阴性克隆的产生。 barnase 基因可被插入的目的DNA 片段所替代。所购买的这一类载体在没有插入目的 DNA 片段的情况下，带有空载体的常用实验室大肠杆菌菌株不能生长.
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询价这些Flexi® 载体是通过CMV 启动，使哺乳动物细胞中带有选择标记的蛋白进行高水平表达的一类特定载体。pF9A 载体带有海肾萤光素酶基因，可以作为转染对照。当外源蛋白（如 转录因子受体）的表达用于报告基因检测时，pF9A 载体可以与 pGL4 萤火虫萤光素酶的载体配合使用。所有的插入片段可以通过 TNT® T7 无细胞表达快速系统 (Cat.# L1170) 来证实。 Flexi® 载体系统是一种简单、但功能强大的蛋白编码序列定向克隆方法。该方法建立在两种位点稀有的限制性酶 Sgfl 和 Pmel 基础 上，可以将蛋白编码区在不同的 Flexi® 载体之间进行快速、高效和高保真的转换，而不需要重新测序。
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