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TNT® Coupled Wheat Germ Extract System (TNT® 麦胚提取物转录 / 翻译偶联系统 ) 为研究者提供了一个可应用于真核生物的无细胞蛋白表达方法,它是一个转录 / 翻译偶联的、在一个试管中即可完成实验的系统。 TNT® 提取物系统大大简化了体外翻译过程,缩短了获得翻译结果所需的时间。使用麦胚提取物进行体外翻译的常规方法一般采用由 SP6 或 T7 RNA 聚合酶启动子在体外合成的 RNA 作模板,整个过程包括多个独立的反应,且每个反应之间有好几个步骤。 TNT® 提取物系统将转录反应的组分直接整合到翻译反应中,形成混合物,避开了常规方法的繁琐步骤。此外,与使用 RNA 模板的常规麦胚提取物体外翻译系统相比, TNT® 提取物系统可在 1.5 小时内生产出更多的蛋白 (2-6 倍 )。 在 TNT® T7 Quick Coupled Transcription/Translation System、Flexi® Rabbit Reticulocyte Lysate System 和 TNT Coupled Wheat Germ Extract System 中,可以使用 25mM 醋酸镁和 2.5M 氯化钾对体外翻译反应进行优化。
询价TNT® Coupled Reticulocyte Lysate System(TNT® 偶联网织红细胞裂解物系统 ) 为研究者提供了基于真核生物无细胞蛋白翻译的另一个选择,该系统将转录 / 翻译偶联在一起,从而使您在一个试管中即可完成实验。 TNT® 裂解物系统大大简化了处理过程,缩短了获得体外翻译结果所需的时间。 常规的用兔网织红细胞裂解物进行体外翻译的方法比较繁琐:一般是经 SP6、 T3 或 T7 RNA 聚合酶启动子在体外合成 RNA 作为模板,需要三个独立的反应,且每个反应有好几个步骤。 TNT® 系统将转录反应的步骤直接整合到翻译反应中,形成混合物,避开了常规方法的繁琐步骤。使用 TNT® SP6 RNA 聚合酶时,为了获得最佳蛋白表达浓度,我们建议在 0.1mM和 0.5mM之间梯度稀释醋酸镁,浓度间隔 0.1mM。在某些情况下增加醋酸镁 0.2mM,蛋白表达可提高 40%。醋酸镁仅在目录号 Cat.# L4600 和 Cat.# L4601 两个产品包装中提供。
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询价TNT® Quick Coupled Transcription/Translation System(TNT® 快速转录 / 翻译偶联系统 ) 可方便地在一个试管内进行偶联的转录 / 翻译反应,适合真核生物无细胞蛋白质表达。 TNT® 快速转录 / 翻译偶联系统将 RNA 聚合酶、核苷酸、盐类、氨基酸、重组的 RNasin® 核酸酶抑制剂与网织红细胞裂解物混合在一起,形成了 TNT® 快速混合母液 (Master Mix)。 TNT® 快速转录 / 翻译偶联系统有两种配置,分别对克隆在 T7 或SP6 RNA 聚合酶启动子下游的基因进行转录和翻译。使用这两种系统时,模板 DNA 的量为 0.2-2.0μg,模板可以是带有 T7 或 SP6 启动子的环状质粒 DNA,也可以是含有 T7 启动子的 PCR 片段,将模板加入到 TNT® 快速混合母液,反应体系为 50μl, 30℃下孵育 60-90 分钟。表达反应可产生足够量的蛋白,用于包括 GST pull-down 和凝胶阻滞电泳在内的多种实验。
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询价TNT® SP6 High-Yield Wheat Germ Protein Expression System ( TNT® SP6 麦胚高产率蛋白表达系统 ) 是一种基于优化的麦胚提取物,在单管内进行的偶联转录/ 翻译系统,可在两个小时之内表达蛋白。生成的蛋白浓度在 10-100μg/ml 之间,可以用于多种基于蛋白质组学方面的研究,也可以用于高通量分析。 除质粒 DNA 或 PCR 模板外,麦胚提取物提供转录/ 翻译过程所需的全部成分。蛋白标记试剂由使用者自行提供。
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