用于TR-FLISA检测的“神器”-KeyTec® TR-FLISA® Enhancement Solution

一、原理

TR-FLISA（TR-FLISA: Time-Resolved Fluorescence Linked Immunosorbent Assay时间分辨荧光免疫分析法）是 ELISA 技术的一种变体，它用时间分辨荧光分子代替酶促反应。该方法相比于传统的ELISA，背景值低、重复性高、灵敏度高，且更省时间。

KeyTec® TR-FLISA® Enhancement Solution 是一种含螯合剂和去污剂的酸性溶液，用于时间分辨荧光免疫分析法（TR-FLISA: Time-Resolved Fluorescence Linked Immunosorbent Assay）中测定最终实验体系中Eu3+/Sm3+偶联物含量。Eu3+/Sm3+标记试剂常用于蛋白质、肽和寡核苷酸等大分子标记，所得到的标记物适用于基于固相分离的各种类型的分析。经过一系列操作步骤，在洗去未结合的部分后，剩余含 Eu3+/Sm3+的标记物被固定到微孔板上。然后加入该溶液，能在几分钟内将 Eu3+/Sm3+从固相结合的标记抗体或蛋白质中解离出来，形成具有极高亮度的时间分辨荧光胶束螯合溶液。使用含时间分辨荧光模块的仪器，即可进行高灵敏度的 Eu3+/Sm3+测量。由于该溶液使Eu3+/Sm3+解离至溶液中并产生增强的时间分辨荧光信号，因此实验背景信号低，测量上限高，从而获得较高信噪比和灵敏度。

二、组分

三、存储条件

 KeyTec® TR-FLISA® Enhancement Solution 在 4 ℃ 可长期保存，建议在有效期内使用本试剂（有效期见CoA 文件）。

• 试剂使用前需要平衡至室温。
• 检测板优选 DELFIA Yellow Plate，也可用透明酶标板进行检测。
  注意：不同酶标板测试的读值有差异。
• 取用试剂需要使用一次性塑料耗材，切勿使用玻璃器皿取用试剂。
• 由于该实验灵敏度非常高，应谨慎操作防止 Eu3+/Sm3+积累污染导致背景过高或者交叉污染。
• 最终洗涤步骤后向 96 孔板加入 200 μL 本试剂，384 孔板加入 50 μL 本试剂。
• 缓慢加入试剂，轻微震荡 5 min，避免剧烈震荡测试板，防止产生气泡和孔间交叉污染。
• 根据 Eu3+/Sm3+螯合物的不同需要孵育不同的时间（5-30 min）后进行检测，具体孵育时间需要初次实验测定。