MART-1 TCR (DMF4) CD8+ NFAT荧光素酶报告基因细胞系如何“工作”

MART-1是表达在黑素细胞表面的分化抗原。蛋白质的一个肽段被发现存在于被CD8+细胞毒性T细胞所识别的MHC复合物中。MART-1存在于大多数皮肤癌中，包括黑色素瘤，并被用作诊断目的的生物标志物。由于该蛋白质的表达仅限于含有黑素细胞的组织（皮肤和视网膜），在其他组织中不存在，MART-1是癌症疫苗和细胞免疫治疗的理想靶点。MART-1肽段26-35是与MHC常见相关并被T细胞受体所识别的一个片段。

CD8是TCR的共受体，也是细胞毒性T细胞的典型标记物。TCR蛋白复合物位于T细胞表面，负责识别结合在MHC（主要组织相容性复合物）分子上的抗原。当TCR受到刺激时，会激活下游的NFAT（活化T细胞核因子）转录因子，诱导各种细胞因子的表达，如白细胞介素2至4和TNF-α。通过使用改良的TCR，T细胞能够通过MHC靶向癌细胞中存在的特定抗原，从而扩大了癌细胞治疗中可以靶向的抗原范围。

该细胞系通过在T Cell Receptor (TCR) Knockout NFAT Luciferase Reporter Jurkat Cell Line (BPS Bioscience #78556) 细胞上通过慢病毒转导（CD8a Lentivirus #78648 和MART-1-Specific TCR Lentivirus Clone DMF4 #78678），过表达人类CD8（NM_001768.6）和MART-1-特异性TCR (DMF4)而生成。TCR（DMF4）特异性识别抗原MART-1（与T细胞识别的黑色素瘤相关抗原-1，或称为Melan-A）。

功能共培养实验示意图，用于验证 MART-1 TCR (DMF4) CD8+  NFAT-Luciferase报告基因Jurkat细胞系。

1. 通过共培养方式评估MART-1特异性TCR细胞。

2.作为MART-1特异性TCR细胞评估的阳性对照。

MART-1 TCR (DMF4) CD8+ NFAT Luciferase报告基因Jurkat细胞表达MART-1 TCR 情况

左图：使用APC-MHC-I Dextramer (HLA-A*02:01 ELAGIGILTV; Immudex#WB02162)标记并流式检测（CD8+ TCR敲除NFAT Luciferase报告基因Jurkat细胞作为阴性对照）。右图：使用PE-anti-hTCR抗体 (Biolegend #306707)染色，并进行流式检测。

使用T2细胞作为抗原呈递细胞进行T细胞活化。

将MART-1 TCR (DMF4) CD8+ NFAT Luciferase报告基因Jurkat细胞与负载不同浓度的MART-1肽（BPS Bioscience #78759, #78760 和 #78761）的T2细胞共培养6小时。进行了ONE Step™ Luciferase酶促反应测定，并将结果以原始荧光强度读数的形式呈现。

CD8+ TCR敲除NFAT Luciferase报告细胞系（不表达TCR）作为阴性对照。

LILRB4 NFAT-Luciferase Reporter Jurkat Recombinant Cell Line

TCR Knockout NFAT-Luciferase Reporter Jurkat Cell Line

CD8+ TCR Knockout NFAT-Luciferase Reporter Jurkat Cell Line

MART-1 TCR (DMF4) CD8+ NFAT-Luciferase Reporter Jurkat Cell Line

NY-ESO-1 TCR (c259) CD8+ NFAT-Luciferase Reporter Jurkat Cell Line

NY-ESO-1 TCR (1G4) CD8+ NFAT-Luciferase Reporter Jurkat Cell Line